Pojawiające się terapie oparte na komórkach, takie jak terapia komórkami macierzystymi i immunoterapia, przyciągnęły szeroką uwagę zarówno w badaniach biologicznych, jak i praktyce klinicznej. Jednak od dawna istniejącą techniczną luką w terapiach komórkowych jest trudność w bezpośredniej ocenie skuteczności leczenia poprzez śledzenie komórek podawanych terapeutycznie. Dlatego bardzo potrzebne są techniki obrazowania umożliwiające śledzenie rozmieszczenia i migracji komórek in vivo.
Optyczna koherentna tomografia (OCT) to dostępna klinicznie technologia obrazowania o ultrawysokiej rozdzielczości i doskonałej głębokości obrazowania. Wykazuje również duży potencjał w obrazowaniu komórkowym in vivo. Jednak ze względu na jednorodność obecnych środków kontrastowych do znakowania komórek OCT (takich jak nanocząstki złota i polimeru) można zaobserwować jedynie rozkład całych populacji komórek. Precyzyjne śledzenie trajektorii pojedynczych komórek nie jest możliwe w przypadku takich konwencjonalnych środków kontrastowych.
Mikrolasery mogą stanowić drogę do śledzenia unikalnych identyfikatorów komórek, biorąc pod uwagę ich mały rozmiar, wysoką intensywność emisji, bogate widma emisji i wąskie szerokości linii. Tutaj pokazujemy, że lasery nanoprzewodowe internalizowane przez komórki zapewniają zarówno sygnał OCT, jak i sygnał fluorescencji. Ponadto komórki można indywidualnie zidentyfikować dzięki unikalnym widmom emisji lasera nanoprzewodów, które przenoszą. Ponadto trajektorie migracji pojedynczych komórek można monitorować zarówno in vitro, jak i in vivo za pomocą systemu obrazowania OCT i mikroskopii fluorescencyjnej o podwójnej modalności. Nasze badanie pokazuje wykonalność laserów nanoprzewodowych w połączeniu z systemem obrazowania dualnego do śledzenia pojedynczych komórek in vivo z wysoką rozdzielczością przestrzenną i weryfikacją tożsamości, podejście o dużej użyteczności w terapiach komórek macierzystych i immunomodulujących.
Mikroskopia optyczna o wysokiej rozdzielczości do charakteryzowania odkształceń mikrostrukturalnych w badaniach mikrozciągania
Obrazowanie deformacji powierzchni próbki kuponu w badaniu mikrozciągania za pomocą mikroskopu optycznego stanowi wyzwanie ze względu na małą głębię ostrości (DoF) mikroskopów optycznych. Ponieważ materiały są niejednorodne w mikroskopijnej skali długości, powierzchnia próbki odkształca się w złożoną teksturę 3D powierzchni, ewoluując w sposób ciągły wraz ze wzrostem obciążenia. Z powodu wąskiej DoF, obszar, który jest ostry w polu widzenia (FoV) zmniejsza się znacznie wraz ze wzrostem odkształcenia heterogenicznego poza płaszczyzną. Aby sprostać temu wyzwaniu, zaproponowano metodę opartą na mieszaniu obrazu i stabilizacji przechwyconych klatek obrazu.
Mieszanie obrazów łączy częściowe obszary, na których jest ustawiona ostrość, z zestawu kolejnych klatek obrazu przechwyconych w różnych odległościach roboczych od płaszczyzny obiektu, aby utworzyć pojedynczy obraz, na którym znajduje się duża część pola widzenia. Następnie uzyskuje się mieszane obrazy na różnych poziomach odkształceń makroskopowych, tj. Globalnego odkształcenia jednorodnego, w celu scharakteryzowania ewolucji odkształcenia heterogenicznego. Stabilizacja obrazu usuwa wszelkie nierówności mieszanych obrazów poprzez ich przestrzenne wyrównanie, wybierając wspólną cechę jako punkt odniesienia.
Walidacja proponowanej metody na próbkach ze stali nierdzewnej 316L (SS 316L) produkowanych konwencjonalnie i metodą przyrostową wskazuje na doskonałą poprawę jakości obrazu. Prawie 100% pola widzenia pozostaje zogniskowane niezależnie od wielkości odkształcenia heterogenicznego poza płaszczyzną spowodowanego podczas testów rozciągania, co jest dość niezwykłe w przypadku obrazowania mikroskopii optycznej. W konsekwencji zmieszane i ustabilizowane obrazy zwiększyły dokładność cyfrowej korelacji obrazu (DIC). Filmy poklatkowe przedstawiające deformację wygenerowane przy użyciu tych obrazów uchwyciły ewolucję pasm poślizgowych i ich transmisję przez bliźniacze granice w mikrostrukturze stali nierdzewnej. Podsumowując, badanie to pokazuje wykonalność wykorzystania technik przetwarzania obrazu w celu udoskonalenia mikroskopii optycznej w celu zobrazowania złożonych powierzchni 3D ewoluujących w czasie. Ten artykuł jest chroniony prawem autorskim. Wszelkie prawa zastrzeżone.
Potencjalna użyteczność zintegrowanej refleksyjnej mikroskopii konfokalnej-optycznej koherentnej tomografii w prowadzeniu selekcji i terapii raka podstawnokomórkowego
Rosnący wskaźnik zachorowalności i chorobowości na raka podstawnokomórkowego (BCC) na całym świecie, w połączeniu z zachorowalnością związaną z konwencjonalnym leczeniem chirurgicznym, doprowadziły do opracowania i zastosowania alternatywnych, minimalnie inwazyjnych metod leczenia niechirurgicznego. Biopsja i patologia służą do prowadzenia diagnozy BCC oraz oceny marginesów i podtypów, które następnie kierują decyzją i wyborem leczenia chirurgicznego lub niechirurgicznego. Jednak alternatywnie można zastosować nieinwazyjne podejście optyczne oparte na łączonej refleksyjnej mikroskopii konfokalnej (RCM) i optycznej koherentnej tomografii (OCT).
Obrazowanie optyczne może być wykorzystywane do prowadzenia diagnozy i oceny marginesu przy łóżku pacjenta i potencjalnie ułatwiania postępowania niechirurgicznego, wraz z długoterminowym monitorowaniem odpowiedzi na leczenie. Obrazowanie nieinwazyjne może również uzupełniać małoinwazyjne metody leczenia i pomóc w dalszym zmniejszaniu zachorowalności. W artykule zwracamy uwagę na aktualny stan zintegrowanego podejścia do obrazowania RCM / OCT do diagnostyki i segregacji BCC, a także do oceny marginesów, które mogą być ostatecznie wykorzystane do prowadzenia terapii.
Multimodalna mikroskopia fotoakustyczna ze wzmocnieniem plazmonicznym złota i optyczna tomografia koherentna obrazowanie molekularne w celu oceny neowaskularyzacji naczyniówki
Podczas gdy mikroskopia fotoakustyczna (PAM) i optyczna tomografia koherentna (OCT) pozwalają na wizualizację mikrokrążenia siatkówki, odróżnienie wczesnej neowaskularyzacji od sąsiednich naczyń pozostaje wyzwaniem. Tutaj złote nanogwiazdki (GNS) funkcjonalizowane peptydem RGD zostały wykorzystane jako multimodalne środki kontrastowe zarówno dla PAM, jak i OCT. GNS mają doskonałe właściwości absorpcji i rozpraszania w obszarze bliskiej podczerwieni, gdzie większość naczyń i tkanek generuje mniej wewnętrzny sygnał fotoakustyczny, mając jednocześnie mały rozmiar, doskonałą biokompatybilność in vivo i doskonałą fotostabilność w nanosekundowym pulsacyjnym oświetleniu laserowym.
 Protein Stain Kit for Transfer Membrane |
|
BSP025 |
Bio Basic |
10Blots, 10prep |
EUR 74.36 |
|
|
 Fmoc-b,b-diphenyl-Ala-OH |
|
B-2725.0250 |
Bachem |
250.0mg |
EUR 139 |
|
Description: Sum Formula: C30H25NO4; CAS# [201484-50-6] |
Fmoc-b,b-diphenyl-Ala-OH |
|
B-2725.1000 |
Bachem |
1.0g |
EUR 357 |
|
Description: Sum Formula: C30H25NO4; CAS# [201484-50-6] |
Fmoc-b,b-diphenyl-Ala-OH |
|
B-2725.5000 |
Bachem |
5.0g |
EUR 1336 |
|
Description: Sum Formula: C30H25NO4; CAS# [201484-50-6] |
 Giemsa stain |
|
20-abx082069 |
Abbexa |
|
|
|
|
Giemsa stain |
|
20-abx082518 |
Abbexa |
|
|
|
|
 Fmoc-b-Ala-OH |
|
B-1025.0005 |
Bachem |
5.0g |
EUR 115 |
|
Description: Sum Formula: C18H17NO4; CAS# [35737-10-1] |
Fmoc-b-Ala-OH |
|
B-1025.0025 |
Bachem |
25.0g |
EUR 236 |
|
Description: Sum Formula: C18H17NO4; CAS# [35737-10-1] |
Fmoc-b-Ala-OH |
|
B-1025.0100 |
Bachem |
100.0g |
EUR 635 |
|
Description: Sum Formula: C18H17NO4; CAS# [35737-10-1] |
 Fmoc-b-Ala-OPfp |
|
B-1765.0005 |
Bachem |
5.0g |
EUR 236 |
|
Description: Sum Formula: C24H16F5NO4; CAS# [149303-38-8] |
Fmoc-b-Ala-OPfp |
|
B-1765.0025 |
Bachem |
25.0g |
EUR 841 |
|
Description: Sum Formula: C24H16F5NO4; CAS# [149303-38-8] |
 Protein Stain-EZ C, Reversible Copper Stain Kit |
|
BSP017 |
Bio Basic |
1kit, 10prep |
EUR 74.36 |
|
|
 Protein Stain-EZG Rapid Coomassie Blue Stain Solution |
|
BSP041 |
Bio Basic |
1KIT, 10prep |
EUR 76.1 |
|
|
 Silver Stain kit |
|
AR0171 |
BosterBio |
1 kit (for 30 assays to stain the gel of 5 X8.5) |
EUR 152 |
 4CN Stain Kit |
|
PW024 |
Bio Basic |
5Preps, 5prep |
EUR 70.88 |
|
|
 TMB Stain Kit |
|
PW025 |
Bio Basic |
5Preps, 5prep |
EUR 70.88 |
|
|
 ClearSight DNA Stain |
|
BH40501 |
Bioatlas |
1ml |
EUR 103 |
|
Description: For DNA staining and vizualization. |
 ClearSight RNA Stain |
|
BH40601 |
Bioatlas |
400µl |
EUR 77 |
|
Description: For DNA staining and vizualization. |
 Pneumocystis Stain Kit |
|
K1434-125 |
Biovision |
|
EUR 425 |
Pneumocystis Stain Kit |
|
K1434-30 |
Biovision |
|
EUR 316 |
 Steiner Stain Kit |
|
K1435-125 |
Biovision |
|
EUR 446 |
 Papanicolaou Stain Kit |
|
K1440-30 |
Biovision |
|
EUR 207 |
Papanicolaou Stain Kit |
|
K1440-500 |
Biovision |
|
EUR 278 |
 Fmoc-b-cyclohexyl-Ala-OH |
|
B-1975.0001 |
Bachem |
1.0g |
EUR 126 |
|
Description: Sum Formula: C24H27NO4; CAS# [135673-97-1] |
Fmoc-b-cyclohexyl-Ala-OH |
|
B-1975.0005 |
Bachem |
5.0g |
EUR 418 |
|
Description: Sum Formula: C24H27NO4; CAS# [135673-97-1] |
Fmoc-b-cyclohexyl-Ala-OH |
|
B-1975.0025 |
Bachem |
25.0g |
EUR 1192 |
|
Description: Sum Formula: C24H27NO4; CAS# [135673-97-1] |
 Fmoc-b-cyclopropyl-Ala-OH |
|
B-2905.0001 |
Bachem |
1.0g |
EUR 345 |
|
Description: Sum Formula: C21H21NO4; CAS# [214750-76-2] |
Fmoc-b-cyclopropyl-Ala-OH |
|
B-2905.0005 |
Bachem |
5.0g |
EUR 1301 |
|
Description: Sum Formula: C21H21NO4; CAS# [214750-76-2] |
) Fontana-Masson Stain Kit (For Argentaffin Cells and Melanin) |
|
FMS-1 |
ScyTek Laboratories |
1 kit(s) |
EUR 216 |
Fontana-Masson Stain Kit (For Argentaffin Cells and Melanin) |
|
FMS-2 |
ScyTek Laboratories |
1 kit(s) |
EUR 133 |
-Ala-OH) Fmoc-b-(2-thienyl)-Ala-OH |
|
B-1665.0001 |
Bachem |
1.0g |
EUR 284 |
|
Description: Sum Formula: C22H19NO4S; CAS# [130309-35-2] |
Fmoc-b-(2-thienyl)-Ala-OH |
|
B-1665.0005 |
Bachem |
5.0g |
EUR 1046 |
|
Description: Sum Formula: C22H19NO4S; CAS# [130309-35-2] |
-Ala-OH) Fmoc-b-(3-pyridyl)-Ala-OH |
|
B-2005.0001 |
Bachem |
1.0g |
EUR 393 |
|
Description: Sum Formula: C23H20N2O4; CAS# [175453-07-3] |
Fmoc-b-(3-pyridyl)-Ala-OH |
|
B-2005.0005 |
Bachem |
5.0g |
EUR 1482 |
|
Description: Sum Formula: C23H20N2O4; CAS# [175453-07-3] |
 Fmoc-b-cyclohexyl-D-Ala-OH |
|
B-2345.0001 |
Bachem |
1.0g |
EUR 151 |
|
Description: Sum Formula: C24H27NO4; CAS# [144701-25-7] |
Fmoc-b-cyclohexyl-D-Ala-OH |
|
B-2345.0005 |
Bachem |
5.0g |
EUR 515 |
|
Description: Sum Formula: C24H27NO4; CAS# [144701-25-7] |
Fmoc-b-cyclohexyl-D-Ala-OH |
|
B-2345.0025 |
Bachem |
25.0g |
EUR 1965 |
|
Description: Sum Formula: C24H27NO4; CAS# [144701-25-7] |
-Ala-OH) Fmoc-b-(3-benzothienyl)-Ala-OH |
|
B-2830.0001 |
Bachem |
1.0g |
EUR 212 |
|
Description: Sum Formula: C26H21NO4S; CAS# [177966-60-8] |
Umożliwiło to wizualizację i różnicowanie poszczególnych mikronaczyń in vivo za pomocą multimodalnego obrazowania PAM i OCT. Szczegółową trójwymiarową dystrybucję GNS uzyskano w ważnym modelu neowaskularyzacji naczyniówkowej (CNV) u żywych królików. Po podaniu GNS kontrast PA zwiększył się 17-krotnie, a intensywność OCT wzrosła o około 167%. Ta zaawansowana platforma do obrazowania molekularnego z GNS zapewnia unikalne narzędzie do szczegółowego mapowania patogenezy mikrokrążenia.
